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              客戶案例| Bio-Techne智選平臺,加速復雜蛋白結構表征

              閱讀:407        發布時間:2020/10/26

                   客戶案例| Bio-Techne智選平臺,加速復雜蛋白結構表征

               

              客戶介紹

              Bio-Techne 公司在全球擁有 2,200 多位員工,是業內 的高質量純化蛋白和試劑解決方案開發商和制造商,代表性產品包括細胞因子、生長因子、抗體、免疫分析、具有生物活性的小分子化合物、組織培養試劑以及細胞和基因治療工作流程解決方案,包括 T 細胞活化技術。

               R&D Systems 是 Bio-Techne 的一個品牌,位于公司總部明尼蘇達州明尼阿波利斯市。大部分業務是為制藥公司生產蛋白質產品。蛋白質產品種類差異很大,從用于小分子藥物篩選的酶到用于免疫腫瘤學研究的阻斷抗體。然而,多種產品類型具有一個共同的屬性,也就是質量。制藥客戶對質量要求很高,產品入庫時必須執行質量檢測。因此,R&D systems 對其蛋白質產品進行了全面檢測,以確保為客戶提供可靠的產品。

               

              ▲ 美國明尼蘇達州明尼阿波利斯R&D Systems實驗室

               

               

              dian覆式體驗  加速復雜蛋白結構表征

              R&D Systems 使用 LC-MS 系統進行蛋白質表征和質量控制:

               

              Thermo Scientific™ Q Exactive™ BioPharma 平臺提供了 3 種不同高分辨精確質量數(HRAM)操作模式,這些模式已針對ding蛋白質表征工作流程進行了優化:

               

              高質量數范圍(HMR)模式專為完整治療性蛋白質的工作流程設計而成,靈活易用。

               

              蛋白質模式可確保亞基的高同位素分辨率,有助于進行自上而下測序。

               

              標準模式可實現無與倫比的采集速度、質量精度和高質量圖譜。

               

               

              我認為 Orbitrap™ 質譜系統確實改變了我們的游戲規則。我們能夠加快復雜蛋白質產品的結構表征,使其更快投放市場;例如我們 近推出的SARS-CoV-2 Spike 蛋白質產品。我們也能夠在短短幾個月內充分可靠地表征產品糖譜,將you質產品推向市場。

               

              Vanquish Flex UHPLC 系統是完全具有生物相容性的色譜系統,在準確度、精密度和靈敏度方面均提供了新的基準。該系統設計主要針對提升正常運行時間、耐用性和可靠性,并可配置多個檢測選項。隨附可靠的創新性 Thermo Scientific™ Viper™手緊接頭連接,輕松提供所需的性能和易用性。

              ▲ Viper 手緊式接頭提供無工具連接,專為所有 LC 系統的整個流體通路設計,改進色譜結果。

               

              專業團隊   專注效能選擇

              由 Mark Whittaker 領導的R&D Systems專家團隊,擁有 70 余年的蛋白質表征專業經驗。

               

              Alex Grill 于 2015 年加入 Bio-Techne 公司 R&D Systems 部門,負責建立實驗室設施,提供專業的質譜分析ji術支持。Alex 獲得明尼蘇達大學藥劑學專業博士學位,并從事有關腫瘤藥物傳遞系統的博士后研究。早期該實驗室中的低分辨 LC-MS 技術將實驗室的檢測能力限制在低分子量蛋白質研究中,同時需要進行人工數據處理和解析。但該公司上市的一些高分子量產品(蛋白質抗體大小約 6,000 Da 到 150,000 Da,甚至更高),使用原有技術測定和控制低水平修飾都非常具有挑戰性。因此,Bio-Techne 公司于 2018 年決定引入 Q Exactive BioPharma 平臺,在更寬的分子量范圍內都能很好地進行肽段和完整蛋白表征。


               

              轉而使用 Orbitrap 的 大好處是我們的表征結果不再存在歧義。完整質量數分析性能和準確度使我有信心告訴我們的同事有關蛋白質變異或修飾確切性質的工藝工程信息。di次看到結果時,我大為震驚

               

              基于Orbitrap高分辨質譜平臺,該團隊能夠提供結構解析,當天即可解答工藝工程問題。以下示例是關于其中一個 R&D System TNF-alpha 蛋白質產品。TNF-Alpha 以三聚體的形式存在,但是使用HPLC-UV進行體積排阻色譜(SEC)分子量測定有時會表明質量與三聚體預期不符。可能因為該批次在生產期間不合格或存儲期間存在問題,但團隊需要確定具體原因,然后使用平臺 SEC-MS 方法分析產品。LC-MS團隊能夠獲得準確的質量結果,該結果給出了零歧義,從而確認該問題是由于單體的氧化變體形成所致。確定原因后,便可以追溯存儲條件和所實施的生產控制。


               

              ▲ 通過 MAbPac SEC-1 色譜柱分離獲得的 TNF-alpha SEC-MS 色譜圖,在此顯示了原始質譜圖和解卷積質譜圖,可在 10 分鐘內識別三聚體和氧化雜質(點擊查看大圖)

               

               

              技術推動變革  構建核心競爭力

               

              這對我們來說是一個巨大的改變。它使我們可以靈活進行各種實驗。Alex在開發SEC-MS方法方面做得非常出色。這項技術的分析效率很高。對我們來說,這是一個在適當的時間利用適當的設備的好機會。而且,Thermo Fisher Scientific提供了quan方位的支持——從銷售、服務到應用支持。

               

               

              我們雄心勃勃,專注質量。我們致力于為內部和外部客戶提供 24 小時周轉時間的分析結果。我們的客戶希望快速解決問題。他們著眼于成本效益和結果周轉速度,而我們希望開發出可以可靠、快速回答這些問題的方法。

               

              高效服務

               

              Bio-Techne 公司打破了過去將其完整大分子量蛋白質的 HRAM LC-MS 檢測外包給其他單位的模式。對于如Orbitrap平臺等內部投資的加碼,可以加快其決策速度,提高效率,并提供更好的客戶/產品交付服務。

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